Estudios científicos

Resveratrol increases glutamate uptake, glutathione content, and S100B secretion in cortical astrocyte cultures

Abstract:

Resveratrol (3,5,4'-trihydroxy-trans-stilbene) is a polyphenol present in grapes and red wine, which has antioxidant properties and a wide range of other biological effects. In this study, we investigated the effect of resveratrol, in a concentration range of 10-250 microM, on primary cortical astrocytes; evaluating cell morphology, parameters of glutamate metabolism such as glutamate uptake, glutamine synthetase activity and glutathione total content, and S100B secretion. Astrocyte cultures were prepared of cerebral cortex from neonate Wistar rats. Morphology was evaluated by phase-contrast microscopy and immunocytochemistry for glial fibrillary acidic protein (GFAP). Glutamate uptake was measured using L-[2,3-3H]glutamate. Glutamine synthetase and content of glutathione were measured by enzymatic colorimetric assays. S100B content was determined by ELISA. Typical polygonal morphology becomes stellated when astrocyte cultures were exposed to 250 microM resveratrol for 24 h. At concentration of 25 microM, resveratrol was able to increase glutamate uptake and glutathione content. Conversely, at 250 microM, resveratrol decreased glutamate uptake. Unexpectedly, resveratrol at this high concentration increased glutamine synthetase activity. Extracellular S100B increased from 50 microM upwards. Our findings reinforce the protective role of this compound in some brain disorders, particularly those involving glutamate toxicity. However, the underlying mechanisms of these changes are not clear at the moment and it is necessary caution with its administration because elevated levels of this compound could contribute to aggravate these conditions.

Comentarios divulgativos:

El resveratrol (3,5,4 '-trihidroxi-trans-estilbeno) es un polifenol presente en las uvas y el vino tinto que tiene propiedades antioxidantes y una gran variedad de otros efectos biológicos. En este estudio investigamos el efecto del resveratrol en un rango de concentración de 10-250 micras, en astrositos primarios corticales; la evaluación de la morfología celular, los parámetros del metabolismo del glutamato, como la captación de glutamato, la actividad de la glutamina sintetasa y el contenido de glutatión total, y la secreción de S100B . Cultivos de astrocito se prepararon de la corteza cerebral de ratas Wistar recién nacidas. La morfología fue evaluada por microscopía de contraste de fase e inmunocitoquímica para la proteína glial fibrilar ácida (GFAP). La captación de glutamato se midió con L-[glutamato] 2,3-3H. La glutamina sintetasa y el contenido de glutatión fueron medidos por ensayos colorimétricos enzimáticos. La morfología poligonal típica se convierte en estrellada cuando los cultivos de astrocitos fueron expuestos a 250 micras resveratrol durante 24 h. En concentración de 25 micras, el resveratrol fue capaz de aumentar la captación de glutamato y el contenido de glutatión. Por el contrario, a 250 micras, el resveratrol disminuye la captación de glutamato. Inesperadamente, el resveratrol en esta alta concentración de glutamina sintetasa aumento de la actividad. Nuestros hallazgos refuerzan el papel protector de este compuesto en algunos trastornos cerebrales, en particular los relacionadas con la toxicidad del glutamato. Sin embargo, los mecanismos subyacentes de estos cambios no son claros en este momento y es necesaria prudencia con su administración porque los niveles elevados de este compuesto podrían contribuir a agravar estas condiciones.