INTRODUATION: Resveratrol, a phytoestrogen present at a high concentration in red wine, has been reported to possess many health benefit effects that are protective against age-related diseases. Protein S (PS), an important anticoagulant factor in the protein C (PC) anticoagulant pathway, is mainly synthesized by hepatocytes, and its plasma level is decreased in high-estrogen conditions such as pregnancy and oral contraceptive use. The aim of this study was to investigate whether resveratrol affects PS expression in HepG2 cells.
MATERIALS AND METHODS: The secreted and intracellular levels of PS were determined by an enzyme-linked ligandsorbent assay and Western blotting. The mRNA expressions of PS, PC and β chain of C4b-binding protein (C4BP-β) were analyzed by reverse transcription-polymerase chain reaction. The PS gene promotor activities in HepG2 cells transiently expressing estrogen receptor (ER) α were examined by a luciferase reporter assay.
RESULTS: Resveratrol dose- and time-dependently down-regulated the PS expression in HepG2 cells at a transcriptional level, resulting in a significant decrease in secreted PS; however, the PC and C4BP-β mRNA expressions were not affected. This action of resveratrol was not mediated through either the ER signaling or those of mitogen-activated protein kinases and protein kinase C. Piceatannol, a hydroxylated metabolite of resveratrol, and genistein, an isoflavone found in soy products, also down-regulated the PS expression.
CONCLUSIONS: Resveratrol down-regulates the PS expression in HepG2 cells in an ER-independent manner, and the two phenolic hydroxyls at carbon-3 and -5 of resveratrol may be involved in this function.
 

El resveratrol, un fitoestrógeno presente en una alta concentración en el vino tinto, se ha demostrado que posee muchos efectos beneficios en la salud que tienen un efecto protector contra enfermedades relacionadas con la edad. La proteína S (PS), un factor anticoagulante importante en la vía de la proteína C anticoagulante (PC), se sintetiza principalmente por los hepatocitos, y su nivel plasmático se reduce en condiciones de alto contenido de estrógeno, tales como el embarazo y el uso de anticonceptivos orales. El objetivo de este estudio fue investigar si el resveratrol afecta la expresión de PS en las células HepG2.
Los niveles intracelulares de secretada y PS fueron determinados mediante un método ligandsorbent ligado a enzimas y Western Blot. Las expresiones de ARNm de PS, PC y la cadena β de la proteína de unión C4b (C4BP-β) se analizaron por reacción en cadena de la polimerasa de transcripción. Las actividades del gen PS promotor en células HepG2 expresión transitoria del receptor de estrógeno (ER) α fueron examinados por un reporter tipo luciferasa.
El resveratrol regula la expresión de PS en las células HepG2 a nivel transcripcional, resultando en una disminución significativa de la secreción de PS, sin embargo, las expresiones de ARNm de PC y C4BP-β no fueron afectados. Esta acción del resveratrol no se vio mediada por señalización o de las proteínas quinasas activadas por mitógenos y la proteína cinasa C. El piceatannol, un metabolito hidroxilado del resveratrol, y la genisteína, una isoflavona que se encuentran en productos de soja, también abajo-regula la expresión de PD .
El resveratrol abajo-regula la expresión PS en las células HepG2 de manera ER-independientes, y los dos hidroxilos fenólicos en el carbono-3 y -5 de resveratrol pueden estar implicados en esta función.