OBJECTIVE: Resveratrol, a naturally occurring stilbene derivative, is a potent free-radical scavenger causing a number of biochemical and antineoplastic effects. It was shown to induce differentiation and apoptosis in leukemia cells. Resveratrol was also identified as an inhibitor of ribonucleotide reductase (RR), a key enzyme of DNA synthesis. We report about the biochemical effects of resveratrol on the concentration of deoxyribonucleoside triphosphates (dNTPs), the products of RR, and on the incorporation of 14C-labeled cytidine into the DNA of HL-60 human promyelocytic leukemia cells.
MATERIALS AND METHODS: Incorporation of 14C-labeled cytidine into the DNA of resveratrol-treated HL-60 cells was measured. Concentration of dNTPs was determined by a HPLC method. Cytotoxic effects of resveratrol, Ara-C, and tiazofurin were analyzed using growth inhibition and clonogenic assays. Induction of apoptosis was studied using a Hoechst/propidium iodide staining method.
RESULTS: We found that resveratrol effectively inhibited incorporation of 14C-labeled cytidine into DNA. Furthermore, incubation of HL-60 cells with resveratrol significantly decreased intracellular dCTP, dTTP, dATP, and dGTP concentrations. Based on these results, we investigated the combination effects of resveratrol with Ara-C or tiazofurin, both antimetabolites, which are known to exhibit synergistic effects in combination with other inhibitors of RR. In growth inhibition, apoptosis, and clonogenic assays, resveratrol acted synergistically with both Ara-C and tiazofurin in HL-60 cells.
CONCLUSIONS: We conclude that resveratrol could become a viable candidate as one compound in the combination chemotherapy of leukemia and therefore deserves further testing.
 

El resveratrol, un derivado natural de los estilbenos, es un potente eliminador de radicales libres que causan una serie de efectos bioquímicos y antineoplásicos. Se ha demostrado que induce la diferenciación y la apoptosis en células de leucemia. El resveratrol también se identificó como un inhibidor de la ribonucleótido reductasa (RR), una enzima clave de la síntesis de ADN. Se presenta sobre los efectos bioquímicos de resveratrol en la concentración de desoxirribonucleósidos trifosfato (dNTPs), los productos de RR, y en la incorporación de 14C-citidina marcado en el ADN de células HL-60 humana con leucemia promielocítica.
La concentración de dNTPs se determinó mediante un método HPLC. Los efectos citotóxicos de resveratrol, se analizaron mediante la inhibición del crecimiento y los ensayos de clonación. La inducción de la apoptosis se analizó mediante un Hoechst con yoduro de propidio.
Se encontró que el resveratrol inhibe eficazmente la incorporación de 14C-citidina marcado en el ADN. Por otra parte, la incubación de células HL-60 con resveratrol redujo significativamente dCTP intracelular, dTTP, dATP, dGTP. Con base en estos resultados, se investigaron los efectos del resveratrol en combinación con Ara-C o tiazofurin, tanto antimetabolitos, que se sabe que presentan efectos sinérgicos en combinación con otros inhibidores de la RR. En la inhibición del crecimiento, la apoptosis, y los ensayos de clonación, el resveratrol actúa sinérgicamente con las dos Ara-C y tiazofurin en células HL-60.
Se concluye que el resveratrol podría convertirse en un candidato viable como un compuesto en la quimioterapia de combinación contra la leucemia y por lo tanto merece más pruebas.